磁珠分選的基本原理
磁性細胞分選的核心，是以抗體辨識目標細胞表面的特定 marker，再透過接合於抗體的磁珠將細胞置於磁場中分離。BioLegend 的 MojoSort 採用免管柱（column-free）設計，僅需一支試管與磁鐵即可完成，操作快速且成本可控。
Positive 與 Negative selection
兩種策略各有適用情境：
- Positive selection（正選）：直接以抗體標記目標細胞並吸附於磁場，留在管壁上的即為目標細胞。純度高，但抗體會結合在目標細胞表面。
- Negative selection（負選）：標記並移除所有「非目標」細胞，未被標記、流出的即為目標細胞。目標細胞表面保持「乾淨」（untouched），適合對下游功能性實驗較敏感的應用。
選擇哪一種，取決於下游實驗是否在意目標細胞表面是否殘留抗體與磁珠。
影響純度與回收率的關鍵
- 起始樣本品質：紅血球與死細胞會干擾分選，建議先行去除
- 細胞濃度與緩衝液：依照建議比例配製，避免非專一性吸附
- 抗體與磁珠的孵育時間與溫度：通常於低溫進行，減少內吞與活化
- 磁場分離時間：過短回收率低，過長則純度可能受影響
純度（purity）與回收率（recovery）往往需要取捨；先界定下游實驗對兩者的要求，再決定策略。
分選後的細胞活性
MojoSort 的免管柱流程對細胞的物理性傷害較小，分選後細胞通常保有良好活性，可直接進入培養、刺激或功能性分析。對 T cell 而言，常見做法是負選取得 untouched T cell 後，再以 anti-CD3／anti-CD28 進行活化擴增。
常見問題排除
- 純度不足：檢查抗體用量與是否完整去除紅血球；可考慮二次分選
- 回收率偏低：確認磁場時間與緩衝液配製；避免細胞團塊
- 下游活性下降：縮短操作時間並全程低溫保存
結語
磁珠分選是細胞純化的高效工具。理解正負選的差異與各步驟的影響因素，才能依實驗目的取得高純度且高活性的細胞族群。